SPIM, neboli mikroskopie využívající osvitu tenké vrstvy vzorku , je neinvazivní metoda wide-field mikroskopie založená na prosvětlování vzorku laserovým svazkem roztaženým pomocí cylindrické čočky nebo vertikální apertury do tvaru čáry (potom se pro metodu používá název light sheet microscopy). Díky kolmému umístění kamery (detektoru) vůči laserovému svazku je obraz promítán z ohniskové roviny na detektor ve 2D projekci. Toto uspořádání přispívá k potlačení šumu (vznikajícího mimo ohniskovou rovinu v podobě signálu) a k tvorbě obrazu blížícího se kvalitou snímkům z konfokálního mikroskopu. Posunem vzorku lze získat optické řezy, ze kterých je poté možné vytvořit 3D rekonstrukci obrazu. Natáčením vzorku a pořizováním snímků pod různými úhly lze získat následnou digitální rekonstrukcí tzv. multi-view 3D model, který obsahuje informace o celém vzorku ve vysokém rozlišení.
SPIM je díky svým unikátním vlastnostem (omezená plocha snímání, nízká intenzita dopadajícího světla, vysoká rychlost snímání omezená pouze rychlostí snímání kamery) jednou z ideálních metod pro live cell imaging (snímání živých buněk).
