Kompaktní konfokální mikroskop Andor BC43 CF

Konfokální mikroskop Andor BC43

Malý velikostí, velký výkonem – takový je nový plug&play konfokální mikroskop od firmy ANDOR, který je vhodný jak pro začínající badatele, tak pro zkušené mikroskopisty!

Díky kompaktním rozměrům (505 x 633 x 443 mm - š x h x v) se BC43 CF vejde i do malého pracovního prostoru, výhodou je rovněž propracovaný design s lehkým, těsným a neprůhledným krytem a vestavěnou antivibrační deskou, takže není potřeba temná komora ani separátní optický stůl.

Méně času na zaučování, více času na zobrazování!

BC43 CF je intuitivní mikroskop, který si díky jednoduchým provozním postupům a minimální údržbě snadno osvojí i začínající vědci!

Integrovaný software

Do BC43 CF je integrován komplementární software pro ovládání a základní zpracování obrazových dat – FUSION, který poskytuje špičkové zobrazování v několika snadných krocích. Výhodou softwaru Fusion je především:

• 3D vizualizace dat v reálném čase současně se snímáním
• Uživatelsky přívětivé rozhraní s intuitivním ovládáním
• Jednoduché nastavení protokolů pro multidimenzionální experimenty
• Post-akviziční zpracování dat – stitching a dekonvoluce zrychlená přes GPU (ClearView-GPU)
• Automatické zachycení snímků velkých vzorků (větších než zorné pole) a stitching do 2D a 3D montáží pro kompletní obraz vzorku
• Patentovaná autofokusační technologie Focus Seek & Lock – pro zjednodušení zaostření na vzorky a udržení zaostření během dlouhých časosběrných snímků a akvizici velkých vzorků

Srdcem BC43 CF je rovněž základní softwarový balíček pro vizualizaci a analýzu mikroskopických dat – IMARIS, který navazuje na Fusion společným datovým formátem *.ims a tím urychluje a zjednodušuje přechod mezi akvizicí a analýzou obrazových dat. Software Imaris uživatelům umožňuje:

• Vizualizovat své mikroskopické snímky v 2D/3D/4D snadno a rychle
• Vytvářet rekonstrukce iso-povrchů pro lepší interpretaci a prezentaci nezpracovaných dat
• Vytvářet jednoduše snímky s vysokým rozlišením a vícerozměrná video sekvencí

K základnímu balíčku Imaris je možné přidat další specifické moduly pro konkrétní aplikace a rozšířit tak možnosti analýzy, např. Imaris pro buněčnou biologii, pro neurovědy aj.

Mammalian cell in prophase. Image was acquired using BC43 confocal mode, using 4 acquisition channels and covering 10 μm Z range at Nyquist. Image was further deconvolved and rendered in Imaris. Dark blue – actin, yellow – microtubules, magenta -mitochondria, cyan-DNA. Image credits: Claudia Florindo, Andor Technology.

Hardware:

• Vysokorychlostní konfokální snímání pro zachycení dynamických dějů v tlustších vzorcích
• Widefield režim pro vzorky citlivé na světlo a pro detekci těch nejslabších signálů
• Flexibilita v zobrazování, možnost kombinace více zobrazovacích modalit v jednom protokolu
• Stolní kompaktní zařízení s neprůhledným, tmavým krytem (odpadá nutnost dark room) a vestavěným antivibračním mechanismem
• 5ti poziční motorizovaný karusel na objektivy
• Efektivní navigace, poloha a zaostření na vzorek s nastavitelnou rychlostí navigace a ostření pomocí ergonomického 3D joysticku
• Patentovaný systém iluminace Borealis pro konfokální a widefield snímání zajišťující uniformní osvětlení celého zorného pole a větší propustnost světelného paprsku
• Vysoce citlivý detektor pro krátké expozice a redukci photobleachingu, který nabízí vysoký dynamický rozsah pro zachycení slabých i jasných signálů v jednom snímku bez saturace

Software:

• Komplementární ovládací software Fusion s modulem pro dekonvoluci ClearView-GPU (až 50x zrychlení přes GPU), který zajišťuje zvýšení rozlišení a kontrastu snímku a zlepšení celkové kvality obrazu
• Jednoduchý pracovní postup od vložení vzorku až po pořízení snímku – stačí vložit vzorek, najít bod zájmu, nastavit meze a jediným kliknutím získat snímek. Není potřeba zdlouhavé zaškolování a předchozí zkušenosti.
• Patentovaná technologie Focus Seek & Lock pro vylepšení zaostřování vzorku i při delších time-lapse experimentech
• Funkce vícerozměrného zobrazení pro vizualizaci celého vzorku – současné vytváření časových snímků, Z-stacks and tile positions
• Automaticky získává data velkých vzorků (větších než zorné pole) a pro úplný obraz je sešívá do 2D a 3D montáže
• Umožňuje multiwell imaging – zobrazuje 6, 12, 24 a 96-jamkové kultivační destičky
• 3D zobrazování dat v reálném čase poskytuje okamžitou vizuální zpětnou vazbu o průběhu experimentu za účelem vyhodnocení a vizualizaci dat v reálném čase
• Základní softwarový balíček Imaris pro vizualizaci a komplexní analýzu 2D/3D/4D mikroskopických dat o velikosti stovek GB, možnost rozšíření o moduly přizpůsobené konkrétním aplikacím

Zebrafish fin in the process of bone regeneration. Image shows the perfect stitching of 4 imaging fields, using three channels and 51 stacks for each field, covering a Z range of 174 μm. Newly formed bony tissue in purple (calcein staining) and cathepsin k+ cells (the osteoclasts) in yellow, DNA is in Cyan. Image credits: Alessio Carletti, Universidade do Algarve

Hlavní mikroskopická jednotka:

• Režimy zobrazování: spinning disk konfokální mikroskopie, epifluorescenční widefield, v procházejícím světle - brightfield a diferenciální fázový kontrast
• Zobrazovací metody: single color, multicolor, Z-stacks, time-lapse, multiposition, multiwell, montáž a 2D/3D stitching
• ClearView GPU: odstraňuje nespecifické signály na pozadí vzorku a vylepšuje rozlišení nad normální optické limity

Kamera:

• Rozlišení: 6.5 μm pixel; 2048 x 2000 pixelů (4.1 MPx)
• Kvantová účinnost: až 82%
• FOV: 18.4 mm diagonálně
• Chlazení: 0°C
• Snímky: monochromatické, 16bit

Iluminace:

• Fluorescenční zdroj: 4 fixní vlnové délky 405 nm, 488 nm, 561 nm, 638 nm
• Procházející světlo: širokospektrální LED

Optika:

• Motorizovaný karusel na 5 objektivů
• Zvětšení objektivů: součástí mikroskopu je vždy objektiv s 2x zvětšením pro usnadnění navigace na vzorku. Zbylé 4 pozice lze osadit objektivy dle výběru a požadavků
• Sada emisních filtrů pro zobrazení běžně užívaných fluoroforů (DAPI, Alexa 488/GFP, Alexa 546/mCherry/TRITC, Cy5/Alexa Fluor 640)
• Motorizovaný XY stage: rozsah polohování 110 x 80 mm; rozlišení 100 nm
• Z-control & Focus: rozsah 14.5 mm
• Seek & Lock Technologie: automatické nalezení ohniskové roviny a zachování stability zaostření při time-lapse experimentech
• Držáky na vzorky: Standardní podložní sklíčka (25 x 75 mm), kultivační misky (průměr 35 mm), vícejamkové kultivační destičky (6, 12, 24 a 96), krycí sklíčko k vícejamkovým komůrkám (2, 4, 8)
• Inkubátor (volitelná položka): Stage-top, posuvné víko pro snadný přístup a výměnu vzorku, ohřívač pro objektivy s olejovou imerzí

Pracovní stanice:

• PC: Windows™ 10 software, 64 GB DDR4 RAM, 512 GB PCIe SSD Boot drive, 4 GB grafická karta, 2 TB úložiště obrazových dat

Flatfish image acquired with Andor Bench Top Confocal BC 43 using multiple tile acquisition and montage. 6 tiles were acquired to compose the image covering a range of 554 µm. The image was rendered with Imaris. Image credit: Marco Campinho, University of Algarve and Claudia Florindo, Andor Technology.

Drosophila egg chamber. The image is a maximum intensity projection of 309 Z planes overing a range of 93 µm. The image was deconvolved using ClearView and rendered in Imaris. (Yellow-DNA, Cyan-actin). Image credit: Rui Silva, University of Algarve and Claudia Florindo, Andor Technology.

This uninjured adult digit (12 week old mouse) comes from a transgenic animal Dmp1 Cre ERT crossed to a TdTomato reporter. The magenta signal correlates with the Td Tomato reporter which would be marking cells of the bone linage (Dmp1 positive) and the ‘cyan’ is a simple Hoechst stain. Image credit: Dr Mekayla Storer, SickKids, Toronto, Canada.

Confocal Imaging modality of the Andor Benchtop confocal BC43 was used to acquire an early-stage Drosophila Embryo. The image presented from this experiment is a result of the stitching of 6 imaging fields, over a Z range of 40 µm. Microtubules are labelled blue, Centrosomes in Yellow and DNA as Magenta. Image credit: Ines Baião-Santos and Álvaro Tavares, University of Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.

GFP and mCherry labeled membrane markers expressed in Drosophila salivary gland cells. Image credit: Cheng-I Jonathan Ma and Julie Brill, Cell Biology Program, The Hospital for Sick Children.

Development of a Drosophila embryo is effortlessly visualised in 3D with up to 4 channels using the confocal imaging mode of the BC43. Image credit: Ines Baião-Santos and Álvaro Tavares, University of Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.

Chicken embryo stage HH15/16 stained with DAPI. At this stage of development, the notochord, neural tube and somites are clearly visible. Image credit: Tomás Azevedo, University of Algarve and Claudia Florindo, Andor Technology

Drosophila embryo stained with neuronal marker were set up on a multi-position/montage acquisition. This selected image is a montage of a 3X3 field at the selected position, with 101 z slices covering 50 µm range. Image credit: Álvaro Tavares, University of Algarve and Claudia Florindo, Andor Technology.

This image is a single 3D view from a timelapse experiment - cell division can clearly be observed throughout the developing Drosophila embryo. DNA is in mangenta, microtubules are in Cyan. Image credit: Ines Baião-Santos and Álvaro Tavares, University of Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.